糖尿病肾病MKR 小鼠蛋白尿与尿中 nephrin、PCX 含量相关性分析

来源： 　作者：　 时间：2015-11-12

蛋白尿是糖尿病肾病（ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ＤＮ）的主要临床症状，是肾脏进展性病变的重要危险因素。近年来有研究发现足细胞损伤与丢失是蛋白尿发生发展的关键，而蛋白尿发生的同时也伴有足细胞骨架异常及重要结构蛋白丢失，并发现足细胞相关结构蛋白ｎｅｐｈｒｉｎ、足细胞标记蛋白（ＰＣＸ）等对于ＤＮ及蛋白尿相关疾病中肾功能评估意义重大［１］。本实验通过分析ＤＮ小鼠ｎｅｐｈｒｉｎ、ＰＣＸ蛋白与其蛋白尿的相关性，为ＤＮ的临床诊治提供实验依据。
１　材料与方法
１．１　实验动物
由美国国立卫生研究院糖尿病研究中心Ｄｒ．Ｄ．ＬｅＲｏｉｔｈ提供的ＭＫＲ小鼠（骨骼肌特异性ＩＧＦ－１受体缺失转基因２型糖尿病小鼠），饲养于湖南中医药大学ＳＰＦ级实验动物中心，许可证号：ＳＹＸＫ（湘）２００９－０００１，经自然交配繁殖。Ｃ５７野生鼠（湖南中医药大学刘伯炎老师惠赠），许可证号：ＳＹＸＫ（湘）２０１３－０００５。
１．２　高脂饲料
由普通饲料加１５％猪油、１％胆固醇组成，由湖南中医药大学ＳＰＦ级实验动物中心加工制成。
１．３　主要仪器与试剂
Ｔｈｅｒｍｏ高速冷冻离心机；ＢｉｏＴｅｋ酶标仪；Ｂｏｘｕｎ　３７℃恒温培养箱；日产ＨＴ７７００型透射电镜；Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ核酸蛋白分析仪；Ｔｈｅｒｍｏ－８０℃冰箱；鼠尿微量白蛋白（ＵｍＡｌｂ）ＥＬＩＳＡ试剂盒、鼠尿ｎｅｐｈｒｉｎ　ＥＬＩＳＡ试剂盒、鼠尿ＰＣＸ　ＥＬＩＳＡ试剂盒（上海晶天生物科技有限公司，ｌｏｔ：２０１４０１１０）；超敏ＥＣＬ化学发光试剂盒（ＳｈａｎｇＨａｉ　Ｎｏｖｌａｎｄ，ＮＬ１２８）。

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