ffh 基因沉默对变形链球菌耐氟菌株耐酸性的影响

来源： 　作者：　 时间：2015-11-11

    龋病的主要致龋菌是变形链球菌，而临床上氟化物高浓度的高频应用，致耐氟菌株选择性生长、致龋能力高于原菌株，这与耐氟菌株的耐酸性改变有关。Gutierrez等的研究发现，变形链球菌耐氟菌株的耐酸性改变与ffh基因的突变有关。siRNA是RNA干扰过程中的双链RNA效应分子，能够特异性抑制同源基因的表达。张桐菲等[4]的研究发现，电穿孔法转染成功后检测发现，24h内siRNA可以成功抑制变形链球菌耐氟菌株耐酸基因ffh的mRNA表达。本实验借助于电穿孔法，通过siRNA阻断ffh基因的表达，观察ffh基因沉默后变形链球菌耐氟菌株耐酸性的变化，从基因水平探讨变形链球菌耐氟菌株耐酸性改变的机制，为临床龋病治疗提供实验依据。
1材料与方法
1.1主要试剂与仪器
变形链球菌UA159-FR（吉林大学口腔医院）；BHI培养基（青岛海博生物技术有限公司）；MicroPulser电转仪AE-8800(Bio-rad美国)；VITEK2-compact细菌鉴定仪(梅里埃生物技术公司，法国)；UV-4802H型紫外可见分光光度计；PB-10标准型pH计（Sartorius，德国）；荧光倒置显微镜（Olympus，日本）；ffh基因siRNA序列由上海吉玛公司合成：siRNA正义序列：GACUAGCCUUCUCAAUUAATT；反义序列：UUAAUUGAGAAGGCUAGUCTT。

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